CHO HCP ELISA 检测试剂盒说明书

货号：HG-HCP003

产品简介：

BlueKit系列系列蛋白A（Protein A）ELISA检测试剂盒是用于定量检测生物制品中蛋白A残留量的专用试剂盒。

本试剂盒采用双抗夹心法，用捕获抗体包被96孔酶标板，制成固相抗体，随后加入标准品和检测样品，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的酶标抗体，形成一个固相抗体-蛋白A-酶标抗体的三明治结合物，反应结束后洗涤，然后加入底物进行显色反应，底物在HRP的催化下由无色转变成蓝色，并在终止液的作用下转变成最终的黄色。在450nm和630nm波长下测定其吸光度值（OD值），其中630nm为校正波长。OD值与样品中的蛋白A含量呈正相关。

检测范围：1.56-100 ng/mL

定量限：1.56 ng/mL

规格：

96T

应用：

适用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。

试剂盒组成：

备 注:所有组分存储温度均为 2~8℃，有效期12个月。

需自行准备的材料

◆酶标仪

◆去离子水

◆微孔板恒温振荡器

◆全新滤纸

◆微量移液器及吸头

◆涡旋振荡器

实验前准备

1.所有试剂以及待测样本需要恢复室温（18-25℃）。所有试剂现配现用。

2.1× 洗液配制：浓缩洗液平衡至室温（18-25℃），不要有结晶。混匀后根据用量，取适量用超纯水按 1：19 的比例，将20× 洗液稀释 20 倍，最终得到 1×洗液。

3.1x 检测抗体配制：50× 检测抗体充分溶解后，离心，然后用稀释液 2 以 1：49 的比例进行稀释。备注：若需同时使用多瓶校准品，请分别溶解后转移至 1.5 mL 无菌离心管，振荡混匀后使用；若每瓶校准品复溶液涉及多次冻融，建议采用 1.5 mL 无菌离心管酌量分装后在≤ -18 ℃保存。

4.1× 酶结合物配制：100× 酶结合物充分溶解后，离心，然后用然后用稀释液 2 以 1：99 的比例进行稀释。 

备注：取出浓缩缓冲液（10×）和稀释液，观察如有结晶属正常现象，于 37 ℃温育直至完-全溶解。

5. 标准品的配制：准备 8 个 1.5mL 离心管，按照标准品浓度依次标记。取 12 微升标准品和 588μL 稀释液 1 分别加入第 1 个离心管，混匀即为ST1（100ng/mL）,剩下7个离心管分别加入300μL稀释液1，再按下图进行梯度稀释。

操作步骤

1.清洗酶标板：用 1× 洗液（300μL/ 孔）洗板三次，拍干。
2.孵育样本：对应加入标准品和待测样本，100μL/ 孔，37℃孵育 1h。
3.清洗酶标板：弃去孔中液体，加入 1× 洗液（300μL/ 孔），洗板五次，拍干。
4.检测抗体孵育：将配制好的 1×检测抗体加入到孔中，100μL/ 孔，37℃孵育 1h。
5.清洗酶标板：弃去孔中液体，加入 1× 洗液（300μL/ 孔），洗板五次，拍干。
6.酶结合物孵育：将配制好的 1×酶结合物加入到孔中，100μL/ 孔，37℃孵育 40min。
7.清洗酶标板：弃去孔中液体，加入 1× 洗液（300μL/ 孔），洗板五次，拍干。
8.显色：使用前的10min 将显色液恢复至室温，每孔加入 100μL，37℃避光孵育 15min。
9.终止：每孔加入 50μL 终止液，轻轻摇动酶标板至显色均匀。
10.上机：10min 内上酶标仪，读取 450nm/630nm 波长处的吸光度值（450nm 为检测波长，630nm 为参比波长）。

结果处理

1.标准曲线OD处理（见下例，仅为示例，具体以实际测定为准）

2. 以标准品理论浓度与对应OD值进行四参数拟合，得到标准曲线（如下图所示）

注意事项

1. 试剂应按标签说明储存，使用前室温（18-25℃）平衡。
2. 预包被板条使用前，请平衡至室温（18-25℃）再打开外包装袋，实验中不用的板条应立即放回包装中密闭封口， 4℃可保存一个月。其余不用试剂应包装好或盖好。
3. 标准品、生物-素及酶结合物体积量很小，使用前请短暂离心，以使管壁或管盖的液体沉积到管底。
4. 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
5. 使用前检查试剂盒内各种试剂。试剂稀释、加样和终止反应应充分混匀或摇匀对实验结果尤为重要。
6. 洗涤过程中反应孔中残留的洗液应在洁净的纸巾上充分拍干，直至看不到水印。勿将纸巾直接放入反应孔中吸水。
7. 底物显色液对光敏感，避免长时间暴露于光下，避免与金属接触影响结果。
8. 本产品为一次性使用的试剂盒，请在效期内使用。

CHO HCP ELISA检测试剂盒产品订购，请联系柏莱源（天津）生物科技有限公司！

柏莱源（天津）生物科技有限公司的优势：

现货供应：公司库存充足，可快速发货，减少用户等待时间。

效期保障：严格把控产品质量，确保试剂效期新鲜，保障实验结果的可靠性。

专业技术支持：提供详细的实验方案和技术指导，帮助用户优化实验条件，提高实验成功率。

定制化服务：根据用户需求，提供个性化的产品和服务解决方案。

售后保障：完善的售后服务体系，及时解决用户在使用过程中遇到的问题。

CHO HCP ELISA检测试剂盒：柏莱源（天津）生物科技有限公司，更多产品资讯，请联系我们哦！