人颗粒酶B ELISA 检测试剂盒说明书

货号：HG-GB001

产品简介：

本试剂盒采用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）法，将人颗粒酶B标准品和待测样本加入预包被抗人颗粒酶B抗体的酶标板，然后加入稀释后的生物i素标记的人颗粒酶B检测抗体，最后加入 Streptavidin-HRP，形成抗体+抗原+抗体‐Biotin+ SA‐HRP 复合物，洗板后加入 TMB 显色液显色。TMB 在 HRP 酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的人颗粒酶B的量呈正相关。
检测范围： 6.86~5000 pg/mL
灵敏度：1.12 pg/mL

规格：

96T

应用：

适用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。

试剂盒组成：

备 注:所有组分存储温度均为 2~8℃，有效期12个月。

需自行准备的材料

◆酶标仪

◆去离子水

◆恒温培养箱

◆全新滤纸

◆微量移液器及吸头

◆涡旋振荡器

实验前准备

1.所有试剂以及待测样本需要恢复室温。所有试剂现配现用。

2.1x洗液配制：浓缩洗液平衡至室温，不要有结晶。混匀后根据用量，取适量用超纯水按1：9的比例，将10x洗液稀释10倍，最终得到1x洗液。

3.标准品的配制:

● 血清和血浆样本，使用即用型标准品S0~S7。
● 其他类型样本，使用高浓度标准品S（50000pg/mL）进行梯度稀释。准备8个1.5mL离心管，按照标准品浓度依次标记。取30μL标准品S+270μL SPB(即样品基质,如培养基、稀释液、自制buffer等) ，所得溶液浓度为5000pg/mL。每个离心管中加入200μL SPB，将5000pg/mL的高浓度标准品按1：2进行梯度稀释。SPB用作零标准（0pg/mL）。

操作步骤

使用前所有试剂组分以及待测样本需要恢复室温。建议所有的标准品和待检样本进行双复孔测定。

1. 试剂准备：提前准备好各种待测试剂、稀释好的标准品和待测样本。
2. 酶标板条确定：计算待测样本和标准品所需酶标板条，将酶标条从铝箔袋取出，剩余的酶标条放回铝箔袋中并封好袋口，低温保存。
3. 每孔加入50μL检测缓冲液。
4. 样本及检测抗体孵育：加入标准品和待测样本，50 μL/孔，确保 15 min 内完成点样。再向每孔加入50 μL 检测抗体。用封板膜封板，置于恒温孵育器，500转/分钟、25℃孵育1小时。
5. 洗板：弃去孔中液体，加入 1×洗液（300 μL/孔）洗板4次，拍干酶标板中残留液体。

6. 酶结合物孵育：将酶结合物加入酶标板中，100 μL/孔，用封板膜封板，置于恒温孵育器，500转/分钟、25℃孵育30分钟。
7. 洗板：同步骤5。
8. 显色：每孔加入 100 μl 显色底物 TMB，室温孵育15~20 分钟。
9. 终止：每孔加入 100 μL终止液，轻轻震动酶标板至显色均匀。
10. 读值：20 min 内读取 450nm/630nm 波长处的吸光度值。450nm 作为检测波长，630nm 作为参比波长。

结果处理

1. 标准曲线OD处理（见下例，仅为示例，具体以实际测定为准）

2. 标准品理论浓度与对应 OD 值以四参数进行拟合，得到标准曲线(如下图所示)。

注意事项

1.样品首i次检测，建议进行至少3个连续倍数的稀释，以在标曲范围内产生至少一个稀释后样品。

2.试剂按标签说明储存，使用前室温平衡。

3.包被酶标板使用前请平衡至室温再打开外包装袋，实验中不用的板条立即放回包装中密封，4℃可保存一个月。其他不用的试剂应包装好或盖好。

4.实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。

5.使用前检查试剂盒内各种试剂。试剂的稀释、加样和终止反应应充分混匀或摇匀对实验结果尤为重要。

6.洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在洁净的纸巾上充分拍干，直至看不到水印。勿将纸巾放入反应孔中吸水。

7.底物显色液对光敏感，避免长时间暴露于光下，避免与金属接触影响结果。

8.本产品为一次性使用的试剂盒，请在效期内使用。

人颗粒酶B ELISA检测试剂盒产品订购，请联系柏莱源（天津）生物科技有限公司！

柏莱源（天津）生物科技有限公司的优势：

现货供应：公司库存充足，可快速发货，减少用户等待时间。

效期保障：严格把控产品质量，确保试剂效期新鲜，保障实验结果的可靠性。

专业技术支持：提供详细的实验方案和技术指导，帮助用户优化实验条件，提高实验成功率。

定制化服务：根据用户需求，提供个性化的产品和服务解决方案。

售后保障：完善的售后服务体系，及时解决用户在使用过程中遇到的问题。

人颗粒酶B ELISA检测试剂盒：柏莱源（天津）生物科技有限公司，更多产品资讯，请联系我们哦！