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细胞残留人白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒

产品简介

BlueKit系列细胞残留人白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒采用双抗夹心酶联免疫检测(ELISA)法。柏莱源生物为谱新生物代理商,具体产品价格与技术问题等信息咨询,请联系我们!

产品型号:HG-IL010
更新时间:2025-04-07
访问量:92
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    细胞残留人白介素10(IL-10)ELISA 检测试剂盒说明书


号: HG-IL010

细胞残留人白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒


产品简介:

本试剂盒采用双抗夹心酶联免疫检测(ELISA)法,将人IL-10 标准品和待测样本加入预包被抗人IL-10 抗体的酶标板,然后加入稀释后的生物i素标记的人IL-10检测抗体,最后加入 Streptavidin-HRP,形成抗体+抗原+抗体-Biotin+ SA-HRP 复合物,洗板后加入 TMB 显色液显色。TMB 在 HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的人IL-10的量呈正相关。

检测范围:1.37~1000 pg/mL

灵 敏 度:0.89 pg/mL

规格:

96T

应用:

适用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。

试剂盒组成:

组分规格配制
标准品Standard(S,S1~S7,SO)300μLx9管S0~S7即用型, S按建议稀释方式操作
包被酶标板Coated Plate8孔×12条即用型
检测缓冲液Assay Buffer12mL×1瓶即用型
浓缩洗液Wash Buffer(10×)50 mL×1瓶用超纯水进行10倍稀释
检测抗体Detection Antibody6mL x1瓶即用型
酶结合物Streptavidin-HRP12mL x1瓶即用型
TMB显色液TMB Substrate12mL×1瓶即用型
终止液Stop Solution12mL×1瓶即用型
封板膜Sealing film5张即用型
说明书1份即用型

备 注:所有组分存储温度均为 2~8℃,有效期12个月。




需自行准备的材料

◆酶标仪

◆去离子水

◆恒温培养箱 

◆全新滤纸

◆微量移液器及吸头

◆涡旋振荡器


实验前准备

1.所有试剂以及待测样本需要恢复室温(18~25°C)。所有试剂现配现用。

2.1x洗液配制:浓缩洗液平衡至室温(18~25°C),不要有结晶。混匀后根据用量,取适量用超纯水按1:9的比例,将10x 洗液稀释 10 倍,最终得到 1x洗液。

3.标准品的配制:

即用型标准品 S1~S7 和 S0 可用于血清和血浆样本。

其他类型样本,用样本基质(SPB)制备标准曲线,例如细胞培养上清液、组织研磨液、细胞裂解液等。尿液样本使用检测缓冲液制备标准曲线。

标准品稀释步骤:人IL-10 高浓度标准品S(10000pg/mL),30 μL+270μLSPB 作为高标准品(1000 pg/mL),每个稀释试管中加入 200LSPB,使用高标准品按 1:2梯度稀释。在进行下一步转移之前彻i底混合每个试管。SPB 用作零标准(0pg/mL)。

细胞残留人白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒



操作步骤

使用前所有试剂组分以及待测样本需要恢复室温(18~25°C)。建议所有的标准品和待检样本进行双复孔测定。

1.试剂准备:提前准备好各种待测试剂、稀释好的标准品和待测样本。

2.酶标板条确定:计算待测样本和标准品所需酶标板条,将酶标条从铝箔袋取出,剩余的酶标条放回铝箔袋中并封好袋口,低温保存。

3.每孔加入 50uL 检测缓冲液。


4.样本及检测抗体孵育:每孔加入标准品(细胞上清液的上样量为 50 uL,血液或血浆样本的上样量为 10uL)和待测样本,确保 15 min 内完成点样。再向每孔加入50 uL 1x检测抗体。用封板膜封板,置于恒温孵育器,500 转/分钟、25°C孵育 1小时。

5.洗板:弃去孔中液体,加入 1x洗液(300 μL/孔)洗板4次,拍干酶标板中残留液体。

6.酶结合物孵育:将酶结合物加入酶标板中,100 uL/孔,用封板膜封板,置于恒温孵育器,500 转/分钟、25℃孵育 30 分

钟。

7.洗板:同步骤 5。

8.每孔加入 100 μL 显色底物 TMB,室温(18~25°C)孵育 15~20 分钟。

9.终止:每孔加入 100 uL终止液,轻轻震动酶标板至显色均匀。

10.读值:20 min 内读取 450nm/630nm 波长处的吸光度值。450nm 作为检测波长,630nm 作为参比波长。

结果处理

1. 标准曲线OD处理(见下例,仅为示例,具体以实际测定为准)

标准品浓度(pg/mL)OD1OD2平均值
1000 2.4132 2.3674 2.3903 
333.33 1.0486 1.0202 1.0344 
111.11 0.4196 0.4064 0.413 
37.04 0.1669 0.1653 0.1661 
12.35 0.0946 0.086 0.0903 
4.12 0.0567 0.0534 0.0551 
1.37 0.0473 0.0433 0.0453 
0.041 0.0372 0.0391 










2. 标准品理论浓度与对应 OD 值以四参数进行拟合,得到标准曲线(如下图所示)。


细胞残留人白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒

注意事项

1.样品首i次检测,建议进行至少3个连续倍数的稀释,以在标准曲线范围内产生至少一个稀释后样品。

2.试剂按标签说明储存,使用前室温(18~25°C)平衡。

3.包被酶标板使用前,请平衡至室温(18~25°C)再打开外包装袋,实验中不用的板条立即放回包装中密封,4℃可保存一个月。其余不用试剂应包装好或盖好。

4.实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。

5.使用前检查试剂盒内各种试剂。试剂稀释、加样和终止反应应充分混匀或摇匀对实验结果尤为重要。

6.洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在洁净的纸中上充分拍干,直至看不到水印。勿将纸巾直接放入反应孔中吸水。

7.底物显色液对光敏感,避免长时间暴露于光下,避免与金属接触影响结果。

8.本产品为一次性使用的试剂盒,请在效期内使用。


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柏莱源(天津)生物科技有限公司的优势:

现货供应:公司库存充足,可快速发货,减少用户等待时间。

效期保障:严格把控产品质量,确保试剂效期新鲜,保障实验结果的可靠性。

专业技术支持:提供详细的实验方案和技术指导,帮助用户优化实验条件,提高实验成功率。

定制化服务:根据用户需求,提供个性化的产品和服务解决方案。

售后保障:完善的售后服务体系,及时解决用户在使用过程中遇到的问题。

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