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293T HCP ELISA检测试剂盒

产品简介

293T HCP ELISA检测试剂盒采用双抗夹心法检测样本中293T HCP含量,将293T抗体预包被在微孔板上,将标准品与待测样本加入到已包被的反应孔内进行孵育。存在的293T蛋白会定量的与微孔板中的抗体结合,洗涤除去未结合物,加入生物i素标记的抗293T蛋白抗体,最后加入亲和素标记HRP,形成抗体-抗原-生物i素抗体-酶标亲和素复合物,通过TMB显色程度指示样品中蛋白含量。

产品型号:HG-HCP001
更新时间:2025-03-27
访问量:101
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    293T HCP ELISA 检测试剂盒说明书

    货号:HG-HCP001

    293T HCP ELISA检测试剂盒

    本试剂仅用于检测样本中293T HCP组分的含量。

    产品简介:

    本品采用双抗夹心法检测样本中293T HCP含量,将293T抗体预包被在微孔板上,将标准品与待测样本加入到已包被的反应孔内进行孵育。存在的293T蛋白会定量的与微孔板中的抗体结合,洗涤除去未结合物,加入生物i素标记的抗293T蛋白抗体,最后加入亲和素标记HRP,形成抗体-抗原-生物i素抗体-酶标亲和素复合物,通过TMB显色程度指示样品中蛋白含量。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分。
    检测范围: 37-27000 ng/mL
    定  量  限: 37ng/mL
    精  密  度: CV%≤10%, RE%≤±15%

    规格:

    96 T

    应用:

    本试剂盒采用双抗夹心法定量分析以293T为表达细胞的生物药中宿主蛋白杂质,可检测293T宿主蛋白杂质所需要的全部组分。

    产品组成:

    组分规格配制
    293T HCP Coated Plate(包被酶标板)8孔×12条即用型
    Anti- 293T HCP -Biotin(检测抗体 100×)150μL×1管1:99用稀释缓冲液稀释
    Streptavidin HRP( 酶结合物 10×) 375μL×3管1:9用稀释缓冲液稀释
    293T HCP Standard(标准品)600μL×1管(81ug/mL)按建议稀释方式操作
    Diluent Buffer (稀释液) 1g×1瓶用 1×PBS-T 现配现用(1g/100ml)
    10×PBS-T Wash Buffer (10×PBS-T洗液)50mL×1瓶1:9用去离子水稀释
    TMB Substrate(显色液)15mL×1瓶即用型
    Stop Solution(终止液)15mL×1瓶即用型
    封板膜 5张即用型
    说明书1份即用型

    产品储存条件与有限期:

    2~8℃避光保存,有效期8个月。

    需要准备材料:

    ◆ 酶标仪
    ◆ 去离子水
    ◆ 微孔板恒温振荡器
    ◆ 全新滤纸
    ◆ 微量加液器及吸头
    ◆ 涡旋振荡器

    试剂配制:

    1.平衡: 将所需试剂移到室温(18~25℃)平衡30分钟。
    2.配液:
    ➀1×PBS-T 洗涤液:计算实验所需工作液体积,取适量 10×PBS-T 洗液,用去离子水进行 10 倍稀释,混匀后备用;
    ➁稀释液工作溶液:根据实验需求取适量稀释液干粉按(1g/100mL)的比例,用 1× PBS-T 溶解混匀,也可一次性稀释后分装,放置 -20 ℃保存。避免稀释液反复冻融。
    ③检测抗体工作液:计算实验所需工作液体积,取适量生物i素抗体用稀释液进行100倍稀释,充分混匀备用;
    ④酶结合物工作液:计算实验所需工作液体积,取适量酶结合物用稀释液进行10倍稀释,充分混匀备用;
    ⑤标准品及样品使用稀释液进行稀释。
    3.标准品稀释:

    管号标准液浓度
    (ng/mL)
    标准液体积
    (μL)
    稀释液体积
    (μL)
    总体积
    (μL)
    终浓度
    (ng/mL)
    剩余体积
    (μL)
    8 81000 110 220 330 27000 220
    7 27000 110 220 330 9000 220
    6 9000 110 220 330 3000 220
    5 3000 110 220 330 1000 220
    4 1000 110 220 330 330 220
    3 330 110 220 330 110 220
    2 110 110 220 330 37 330
    1 //220 220 0 220

    实验步骤:

    1.使用前,将所有试剂充分混匀,避免产生气泡。
    2.根据实验孔数量,确定所需的板条数目,剩余板条放回含干燥剂的铝箔袋,密封。
    3.加样: 每孔加入100μL标准品、样品、阴性对照至相应孔中。用封板膜封板后在室温(18~25℃)下反应1.5h。

    4.洗涤: 弃去各孔内液体,用1×PBS-T洗涤液注满微孔(250μL/孔),静置30秒后弃去孔内液体;重复3次,每一次洗板完成后在滤纸上拍干。
    5.加生物i素检测抗体工作液: 每孔加生物i素检测抗体工作液100μL,用封板膜封板后室温(18~25℃)下反应45分钟。
    6.洗涤: 弃去各孔内液体,用1×PBS-T洗涤液注满微孔(250μL/孔),静置30秒后弃去孔内液体;重复3次,每一次洗板完成后在面巾纸上拍干。
    7.加酶结合物工作液: 每孔加酶结合物工作液100μL,用封板膜封板后室温(18~25℃)下反应30分钟。
    8.洗涤: 弃去各孔内液体,用1×PBS-T洗涤液注满微孔(250μL/孔),静置2 min后弃去孔内液体;重复3次,每一次洗板完成后在面巾纸上拍干。
    9.显色: 每孔分别加底物显色液100μL,轻微振荡混匀后用封板膜封板置25℃避光显色15分钟。
    10.测定: 每孔加终止液100μL,轻微混匀。选择酶标仪主波长450nm,测定各孔吸光值(OD值)。

    结果分析:

    本产品建议采用四参数的拟合方式进行线性拟合及计算。

    标准曲线OD处理(见下例,仅为示例,具体以实际测定为准):

    标准品浓度(ng/mL)O D 值 ( 1 )O D 值 ( 2 )平均值
    27000 2.507 2.494 2.501
    9000 1.73 1.733 1.732
    3000 1.126 1.111 0.119
    1000 0.773 0.77 0.772
    330 0.496 0.475 0.486
    110 0.289 0.285 0.287
    37 0.205 0.195 0.200
    0 0.140 0.137 0.139
    以标准品理论浓度与对应OD值进行四参数拟合,得到标准曲线(如下图所示)


    注意事项

    1. 试剂应按标签说明储存,使用前室温(18-25℃)平衡。
    2. 预包被板条使用前,请平衡至室温再打开外包装袋,实验中不用的板条应立即放回包装中密闭封口, 4℃可保存一个月。其余不用试剂应包装好或盖好。
    3. 标准品、生物i素及酶结合物体积量很小,使用前请短暂离心,以使管壁或管盖的液体沉积到管底。
    4. 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
    5. 使用前检查试剂盒内各种试剂。试剂稀释、加样和终止反应应充分混匀或摇匀对实验结果尤为重要。
    6. 洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在洁净的纸巾上充分拍干,直至看不到水印。勿将纸巾直接放入反应孔中吸水。
    7. 底物显色液对光敏感,避免长时间暴露于光下,避免与金属接触影响结果。
    8. 本产品为一次性使用的试剂盒,请在效期内使用。


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柏莱源(天津)生物科技有限公司的优势:

现货供应:公司库存充足,可快速发货,减少用户等待时间。

效期保障:严格把控产品质量,确保试剂效期新鲜,保障实验结果的可靠性。

专业技术支持:提供详细的实验方案和技术指导,帮助用户优化实验条件,提高实验成功率。

定制化服务:根据用户需求,提供个性化的产品和服务解决方案。

售后保障:完善的售后服务体系,及时解决用户在使用过程中遇到的问题。

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