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细胞残留人白介素15(IL-15)ELISA检测试剂盒

产品简介

BlueKit系列细胞残留人白介素15(IL-15)ELISA检测试剂盒采用双抗夹心法,用于定量检测血清、血浆或细胞上清中人IL-15蛋白的含量。柏莱源生物为谱新生物代理商,具体产品价格与技术问题等信息咨询,请联系我们!

产品型号:HG-IL015
更新时间:2025-04-03
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    细胞残留人白介素15(IL-15) ELISA检测试剂盒说明书


货号: HG-IL015

细胞残留人白介素15(IL-15)ELISA检测试剂盒


产品简介:

BlueKit@系列细胞残留人白介素 15(IL-15) ELISA 检测试剂盒采用双抗夹心法,用于定量检测血清、血浆或细胞上清中人1-15 蛋白的含量。将特异性抗人儿-15 单克隆抗体包被在微孔板上,反应孔内加入标准品、待测样本、检测抗体,室温(18~25°C)孵育,洗涤后再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤后加入显色液TMB。颜色反应的深浅与目标蛋白浓度成正比。


检测范围:3.91-250pg/mL

灵 敏 度:0.24 pg/mL

精密度:CV%≤10%,RE%≤士15%

规格:

96T

应用:

适用于血清、血浆、细胞培养上清及其他生物学样本中人儿-15 蛋白含量测定。

试剂盒组成:

组分规格配制
包被酶标板(Coated Plate,CP)8孔x12条即用型
人IL-15标准品(Human IL-15 Standard,S)300μLx1管(2500pg/mL)用样品稀释液按比例稀释
检测抗体(Detect Antibody,DA)6mLx1瓶即用型
酶结合物(Streptavidin-HRP,SH)12mLxl瓶即用型
检测缓冲液(Assay Buffer,AB)12mLx1瓶即用型
样品稀释液(Sample Diluent,SD)15mlx1管即用型
10x洗液(10x Wash Buffer,WB)50mL xl瓶1:9用去离子水稀释
显色液(TMB Substrate,TS)12mLx1瓶即用型
终止液(Stop Solution,SS)12mLx1瓶即用型
封板膜(Sealer film,SF)5张即用型
说明书(Instruction For Use,IFU)1份即用型

备 注:所有组分存储温度均为 2~8℃,有效期12个月




需自行准备的材料

◆酶标仪

◆去离子水或蒸馏水

◆恒温培养箱    

◆全新滤纸

◆微量移液器及吸头

◆涡旋振荡器


试剂配制

1x洗液根据实际用量,取适量10x浓缩洗液用去离子水 10 倍稀释)


标准曲线的制作

人IL-7标准品S5000 pg/mL40uL+360LSD 作为高标准(500pg/mL)。每个稀释试管中加入200μLSD,使用高标准制备 1:1稀释系列。在进行下一步转移之前彻i底混合每个试管。SD 用作零标准(0pg/mL)。


细胞残留人白介素15(IL-15)ELISA检测试剂盒


操作步骤

检测之前请将所有的试剂、样本恢复至室温(18~25°C)。

1.准备好所有需要的试剂及工作浓度标准品。

2.将不需要的板条拆卸下来,放回铝箔袋,重新封好封口。

3.每孔加入 50uL检测缓冲液(AB)。

4.加入 50uL 的标准品(S)、样本。保证连续加样,请不要间断。加样过程在 15 分钟内完成。

5.每孔加入50uL检测抗体(DA)。

6.使用封板膜封板。500 转/分钟振荡,室温(18~25°C)孵育1个小时。

7.弃掉孔内液体,每孔加入 300uL洗液洗板,洗涤4次。每次洗板,在吸水纸上拍干。为获得理想的实验性能,必须彻i底移除残留液体。

8.加入 100uL 酶结合物(SH)。

9.使用新的封板膜封板。500 转/分钟振荡,室温(18~25°C)(18-25°C)孵育 30 分钟。

10.重复步骤 7。

11.每孔加入 100μL 显色液,避光室温(18~25°C)孵育 10-15 分钟。

12.每孔加入 100μL 终止液。

13.在 30 分钟之内,酶标板 450nm 波长测定 OD 值,校正波长设定为 570nm 或者 630nm。


结果处理

1. 标准曲线OD处理(见下例,仅为示例,具体以实际测定为准)



 标准品浓度(pg/mL)OD1OD2平均值
250.00 3.1130 3.0550 3.0840 
125.00 2.1470 2.0170 2.0820 
62.50 1.2330 1.0960 1.1645 
31.25 0.6350 0.6030 0.6190 
15.63 0.3069 0.3381 0.3225 
7.81 0.1822 0.1820 0.1821 
3.91 0.1116 0.1070 0.1093 
0.00 0.0537 0.0513 0.0525 









2. 以标准品理论浓度与对应OD值取1og后进行直线拟合,得到标准曲线(如下图所示)

细胞残留人白介素15(IL-15)ELISA检测试剂盒

注意事项

1. 样品首i次检测,建议进行至少3个连续倍数的稀释,以在标准曲线范围内产生至少一个稀释后样品。
2. 试剂按标签说明储存,使用前室温(18-25℃)平衡。
3. 包被酶标板使用前,请平衡至室温(18-25℃)再打开外包装袋,实验中不用的板条立即放回包装中密封,4℃可保存一个月。其余不用试剂应包装好或盖好。
4. 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
5. 使用前检查试剂盒内各种试剂。试剂稀释、加样和终止反应应充分混匀或摇匀对实验结果尤为重要。
6. 洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在洁净的纸巾上充分拍干,直至看不到水印。勿将纸巾直接放入反应孔中吸水。
7. 底物显色液对光敏感,避免长时间暴露于光下,避免与金属接触影响结果。
8. 本产品为一次性使用的试剂盒,请在效期内使用。


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柏莱源(天津)生物科技有限公司的优势:

现货供应:公司库存充足,可快速发货,减少用户等待时间。

效期保障:严格把控产品质量,确保试剂效期新鲜,保障实验结果的可靠性。

专业技术支持:提供详细的实验方案和技术指导,帮助用户优化实验条件,提高实验成功率。

定制化服务:根据用户需求,提供个性化的产品和服务解决方案。

售后保障:完善的售后服务体系,及时解决用户在使用过程中遇到的问题。

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