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产品简介
Gibco分散酶Dispase II，粉末是一种氨基内肽酶，可水解非极性氨基酸残基的 N 端肽键。该序列常见于胶原蛋白。分散酶 II 具有温和的蛋白水解作用，可用于原代细胞的分离和常规传代。分散酶 II 相对温和，在生理温度和 pH 值条件下具有良好的解离能力，通常可维持细胞膜完整性。
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【产品名称】Gibco分散酶Dispase II，粉末
【产品货号】17105041
【产品规格】5 g
【产品状态】冻干
【产品类型】细胞培养解离试剂
【产品效期】24个月
【产品运输】室温
【产品简介】Gibco分散酶Dispase II，粉末是一种氨基内肽酶，可水解非极性氨基酸残基的 N 端肽键。该序列常见于胶原蛋白。分散酶 II 具有温和的蛋白水解作用，可用于原代细胞的分离和常规传代。分散酶 II 相对温和，在生理温度和 pH 值条件下具有良好的解离能力，通常可维持细胞膜完整性。Gibco™ 分散酶 II 在多粘芽孢杆菌中生产，包装形式为冻干非无菌粉末，供细胞或组织解离等研究使用，并防止在悬浮培养中结团。我们保证 Gibco™ 分散酶 II 的活性大于 0.5 单位/mg。
【产品使用】
重建Dispase
1. 将非无菌酶溶解在Dulbecco 's磷酸缓冲盐水(DPBS)中，不含钙和镁至10 mg/mL。
2. 再用不含钙和镁的DPBS稀释至终浓度0.6-2.4 U/mL。
注意:浓度不建议高于2.4 U/mL。
3.通过0.22µm的过滤膜过滤灭菌。
分离组织
1.用无菌剪刀将组织切成3-4毫米的小块。
2.在不含钙和镁的无菌DPBS中清洗几次组织片。
3.将组织片段浸入Dispase溶液(0.6-2.4 U/mL)中，37℃孵育。
4.在37°C下缓慢搅拌，直到组织充分溶解。对于致密组织，我们建议孵育1小时。即使经过几个小时的消毒，细胞也不会受到不良影响。
5.如有必要，通过无菌不锈钢或尼龙网将分散的细胞从残留组织中分离出来，或者在较大的碎片沉淀后简单地倒入细胞。如果需要进一步分解，可以向剩余的组织碎片添加新鲜的Dispase溶液。
6.离心使细胞成球，倒入酶溶液。
7.将细胞颗粒重新悬浮在适当的培养基中。使用伯爵夫人®自动细胞计数器确定活细胞密度(可使用自动或手动替代方法)。
8.将细胞植入含有适当培养基的培养容器中，在预定条件下进行培养。
注:通过将浓度为0.3-0.6 U/mL的disase与胶原酶(60-100 U/mL)混合，可以更有效地分离组织。
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