细胞培养支原体怎么预防？

支原体污染事后除菌成本高、耗时长，建立全流程预防体系是性价比最-高的方案，本文从 4 个关键节点落地标准化防控。

一、到货查验

l 新购入细胞、胎牛血清、胰酶到货后，先取样做支原体 PCR 筛查，确认阴性再投入使用；

l 培养基、消化液按需小剂量分装，分装时 0.22μm 滤器二次过滤，避免整瓶原料污染浪费。

二、环境消杀

l 培养箱、超净台每周 75% 酒精擦拭内壁，每日紫外照射 30min；每月臭氧密闭过夜深度灭菌；

l 超净台减少闲置耗材堆放，保证层流风正常循环，降低气溶胶支原体滞留概率。

三、规范操作

l 感冒、呼吸道感染人员禁止进入细胞房，必须操作时全程双层口罩 + 无菌实验服 + 无粉手套；

l 所有入超净台试剂瓶外壁酒精擦拭；废液及时封口丢弃，不在超净台内倾倒废液。

四、严控滥用

常规非珍贵细胞培养液不长期添加广谱抗生素，滥用抗生素会诱导支原体耐药；普通细胞一旦确诊污染直接报废，不盲目加药挽救，避免耐药支原体在实验室扩散。

五、抽检制度

珍贵保藏细胞每月定期抽检支原体，早发现微量污染，避免大范围扩散。

总结

落实「入库检测 + 环境消杀 + 规范操作 + 定期抽检」四项制度，可把实验室支原体污染率降到极低水平。

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