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DMEM、MEM、F12、1640培养基区别在哪里?

更新时间:2023-11-11点击次数:1656

当你导师安排养一个没养过的细胞,不知道用什么培养基的时候,是否也在为选培养基而苦恼?面对DMEM培养基、MEM培养基、F12培养基、1640培养基等种类繁多的培养基时要怎么选择呢?

这种时候大家要一起记住:

ü 没有什么培养条件是jue对正确的;

ü 没有什么细胞是咱养不活的;

ü 参考文献没有那就不参考了;

ü 反正文献也不一定是对的;

但如果你的细胞没STR鉴定过,没有亲自原代分离过,还各种支原体立克次氏体污染、黑胶虫污染,那你当我没说。我劝你尽快丢掉!

让我们先科普下培养基的选择。

目前合成培养基主要有:

→基础培养基(常用)

→无血清培养基

→无蛋白培养基

→限定化学成分培养基

它们对血清添加量的要求各不相同,目前常用的是基础培养基。基础培养基是细胞生存的直接环境,为细胞生长提供丰富的营养物质,并能调节培养体系的 pH值和渗透压。因此培养基的质量和选择对于细胞培养至关重要。

四种常用培养基的比较:

培养基类型

基本概述

组成成分

适用范围

应用范围

RPMI-1640 Medium

RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。

含有还原剂谷胱甘肽、高浓度的维生素,生物素。WEI生素B12以及PABA。

HeLa、JurkatMCF -7 PC12PBMC、星形片质细胞,癌细胞K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

尤其适用于悬浮细胞的培养。

MEM(Minimum Essential Medium)

也称最di必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。

仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。

MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。HeLaBHK-21 293 T、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纤维细胞,原代大鼠星形胶质细胞等。

适于各种哺乳动物细胞的生长。

DMEM高糖(标准型)

DMEM-高糖(标准型) 是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。

DMEM培养基 与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠氨基酸。

适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。原代成纤维细胞 神经元胶质细胞、HUV EC、平滑肌细胞 HeLa293T、PC-12等细胞系。

DMEM高糖型:应用于生长快、粘附性低的细胞,杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞,单一细胞。

DMEM/

F12

DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。

DMEM/F-12 DMEM培养基和Hams F-12培养基的1:1混合物。

该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。MDCK 神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞、大鼠成纤维细胞等。

1.广泛用于支持多种哺乳动物细胞的生长;

2.无血清培养基的基础:

3.低血清含量下哺乳动 物细胞的培养以及克隆密度培养。

一、常见贴壁细胞培养条件:

1.接种浓度5×10*8个细胞/L;

2.培养基:MEM或DMEM,胎牛血清浓度:10%-80%;

3.37℃,5%CO2培养箱;

4.起始培养减少震荡,防止贴壁细胞脱落。

二、常见悬浮细胞培养条件:

1.原代培养时尽量去红;

2.短期培养可选择添加10%胎牛血清的RPMI 1640;长期培养淋巴细胞时,要加入细胞因子;

3.37℃,5%CO2培养箱;

4.每隔3天进行半量换液。

本期内容:DMEM、MEM、F12、1640培养基区别在哪里?

下期内容:如何让细胞“冻"起来?




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