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TECHNICAL ARTICLES
更新时间：2026-05-09
点击次数：25
细胞计数的误差波动常高达20-30%，很多时候不是技术不行，而是缺少一份可执行的标准化操作流程（SOP）。下面给出一个可直接套用的SOP框架。
l 台盼蓝储存液（0.4%）分装于1.5mL离心管，避光4℃保存，每月更换新分装。
l 使用前经0.22μm滤膜过滤（去除沉淀）。
l 取细胞悬液与台盼蓝按1:1混合（原代细胞用0.2%台盼蓝），室温染色恰好2分钟后立即计数。
l 染色后超过5分钟未计数则重新染色。
l 清洁血球计数板与盖玻片至出现牛顿环。
l 加样体积固定为10μL，从盖玻片边缘注入，避免气泡。
l 计数四角的4个大方格，边缘细胞执行“计上不计下，计左不计右"。
l 当团块比例＞10%时，重新吹打细胞悬液至单细胞比例＞90%。
l 浓度计算：浓度(cells/mL) = (四个大方格总活细胞数/4) × 稀释倍数 × 10⁴
简化速算：总活细胞数N × 稀释倍数D × 2500。
模块三：数据记录模板
建议设计一张表格，每批次记录以下信息：
l 细胞系/代次/处理
l 台盼蓝批次及是否过滤
l 染色时间（必须精确到min）
l 四个大方格的活细胞数 / 死细胞数
l 总细胞浓度 & 活力%
l 计数人签名
l 是否与自动计数仪交叉对比（记录偏差）
为什么SOP如此重要？
同一份细胞悬液，A计数为1.2×10⁶/mL，B计数为0.9×10⁶/mL，两人谁对？没有SOP就无法复盘。SOP的作用不是限制操作者，而是让每一次计数都可追溯、可复现。
柏莱源（天津）生物科技有限公司的优势:
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