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酵母单杂交与酵母双杂交的区别:一文看懂Y1H和Y2H如何选择

更新时间:2026-04-29点击次数:20

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酵母单杂交(Y1H:检测对象是DNA与蛋白质的结合。它回答的问题是:这个DNA序列能招募到哪个蛋白(通常是转录因子)?"

酵母双杂交(Y2H:检测对象是蛋白质与蛋白质的互作。它回答的问题是:蛋白A能和蛋白B直接结合吗?"

系统组件对比

对比项

酵母单杂交(Y1H)

酵母双杂交(Y2H)

Bait成分

目标DNA序列串联报告基因

Gal4-BD融合蛋白(Bait蛋白)

Prey成分

AD融合待测蛋白(转录因子库)

AD融合蛋白库(Prey蛋白)

互作层级

DNA-蛋白结合后重组装AD到报告基因上游

两个蛋白结合后重组装BDAD成功能转录因子

典型应用

鉴定调控元件的结合蛋白;绘制转录因子-DNA调控网络

筛选互作蛋白伴侣;构建蛋白互作网络

如何根据研究目标选择?

如果你想找某段启动子DNA上未知的结合蛋白,或者验证一个转录因子是否能与特定DNA基序结合,用Y1H。如果你想验证两个已知蛋白是否存在直接物理互作,或是用诱饵蛋白去"出未知的互作蛋白,用Y2H

两者在实验流程上也有差别:Y1H常常要构建串联重复的DNA诱饵菌株,Y2H则注重融合蛋白表达和毒性检测。选对体系,事半功倍。

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