PEI转染试剂的操作要点

　　PEI转染试剂是一种基于聚乙烯亚胺的阳离子聚合物转染工具，通过静电作用与带负电的核酸结合形成复合物，促进细胞摄取并实现基因表达。

　　相比脂质体等其他转染试剂，PEI转染试剂原料成本低，且部分产品用量少，多数产品可在含血清的培养基中使用，转染前后无需更换培养基；且能提供可重复的转染结果。

　　操作要点：

　　细胞状态：确保细胞处于对数生长期，融合度达70%-80%。

　　试剂比例：DNA与PEI的比例需优化，不同细胞系需预实验确定配比。

　　复合物制备：将稀释后的PEI与核酸在无血清培养基中混合，静置15-30分钟。

　　转染处理：将复合物逐滴加入细胞培养基，轻柔混匀后继续培养。

　　结果检测：通常在24-72小时后通过荧光显微镜、Western Blot或qPCR评估转染效率。

　　毒性控制：对于敏感细胞，可在转染4-6小时后更换新鲜培养基以减少毒性；降低PEI/DNA比例或复合物孵育时间也可减轻细胞损伤。

　　适用范围广：既能转染 HEK293等常见细胞系，也可用于部分原代细胞转染；同时可适配 DNA、RNA、寡聚核酸等多种核酸分子，还特别适合多质粒共转染，常用于重组病毒载体(AAV、LV 等)生产和重组蛋白瞬时表达。