Gibco II 型胶原酶除了具有高活性外,还含有较高的梭菌蛋白酶活性,在消化心脏、骨、甲状腺、软骨和肝脏等组织时表现出色。同时,它在生理温度和 pH 条件下具有良好的解离能力,无需机械搅拌或特殊设备。此外,该酶还含有其他蛋白酶、多糖酶和脂酶,能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他成分。
优势:
高效解离:针对胶原的特异性切割能力,确保组织解离*底。
温和条件:生理温度和pH值下操作,减少细胞损伤。
多组织适用性:支持多种组织类型的细胞解离,应用广泛。
Gibco II 型胶原酶的使用方法与储存事项:
溶解与稀释:
推荐使用Hanks' Balanced Salt Solution(HBSS)含钙和镁的溶液进行溶解,确保酶活性稳定。
可根据实验需求稀释至不同浓度(如0.5-2.5mg/mL用于组织解离,1-2mg/mL用于软骨消化)。
操作步骤:
将组织剪成小块,加入胶原酶溶液,37℃水浴或孵箱中振摇消化。
消化时间因组织类型而异(如致密结缔组织需4-48小时,易消化组织仅需15-45分钟)。
消化后通过离心、过滤去除未消化组织,用培养液漂洗细胞,制成悬液接种。
储存与运输:
储存条件:2°C至8°C,避光保存,确保酶活性长期稳定。