HYPHEN BioMed 凝血因子缺乏血浆试剂盒（Deficient Plasma）说明书

更新时间：2025-06-08

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Deficient Plasma是用于精确测量四种关键凝血因子（VIII:C, IX, XI, XII）活性的专业诊断试剂盒。其核心是利用特定因子缺乏的冻干血浆作为反应基础，通过检测加入稀释待测血浆后的凝固时间，在标准曲线的辅助下计算出待测因子的活性水平。操作流程严谨，需特别注意生物安全、试剂复溶、样本稀释、孵育时间精确性、校准曲线建立和质控。

一、基本信息

· 产品名称：凝血因子 Ⅷ:C、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ 缺乏血浆。

· 注册信息：CE IVD 认证。

· 规格：

i. DP040A/K：用于因子 Ⅷ:C，分别为 1×1 mL 和 6×1 mL。

ii. DP050A/K：用于因子 Ⅸ，分别为 1×1 mL 和 6×1 mL。

iii. DP070A/K：用于因子 Ⅺ，分别为 1×1 mL 和 6×1 mL。

iv. DP080A/K：用于因子 Ⅻ，分别为 1×1 mL 和 6×1 mL。

二、预期用途

该试剂盒分别适用于采用凝血法，在存在脑磷脂、激活剂（aPTT 试剂）和钙的条件下，通过手动或自动化方法，对人体枸橼酸化血浆中的因子 Ⅷ:C（FVIII:C）、因子 Ⅸ（FIX）、因子 Ⅺ（FXI）或因子 Ⅻ（FXII）活性进行定量测定。

三、核心原理（凝固法）：

缺乏血浆： 提供除待测因子（FVIII:C, FIX, FXI 或 FXII）外所有其他凝血因子（这些因子含量正常且恒定过量）。

待测血浆： 提供待测因子。需要按比例稀释（通常是1:10）。

反应启动： 加入磷脂（模拟血小板膜）、激活剂（激活接触途径）和钙离子，启动内在凝血途径。

检测依据： 待测因子是凝血反应的限速因子。凝固时间 (CT) 与待测因子的浓度成反比。浓度越高，凝固时间越短；浓度越低，凝固时间越长。

校准曲线： 用已知浓度的标准品（校准血浆）建立双对数坐标（log-log）上的标准曲线（凝固时间 vs 因子浓度%），用于计算未知样本的因子活性。

四、关键组分

[DP] 缺乏血浆： 待测因子活性 <1%，其他凝血因子 >50% 正常范围。

需要但未提供的试剂/材料：

蒸馏水（复溶用）

咪唑缓冲液 (Imidazole Buffer)

0.025M 氯化钙 (CaCl₂)

aPTT 试剂 (如 CEPHEN™)

校准品 (Calibrator, 如 BIOPHEN™ Plasma Calibrator 222101)

质控品 (Controls, 如 BIOPHEN™ Normal Control 223201, Abnormal Control 223301)

水浴/半自动/全自动凝血仪、秒表、移液器、试管等。

五、操作流程

样本要求：

采血：9份血 + 1份 0.109M (3.2%) 枸橼酸钠抗凝剂。弃去第一管。

流程概要：

1. 复溶： 用精确1mL蒸馏水复溶缺乏血浆、校准品、质控品。混匀（避免起泡）。手动法需室温稳定30分钟。

2. 建立校准曲线：

①　用正常混合血浆（1:10稀释定义为100%）或特定校准品。

②　制备一系列稀释度（如1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160），对应不同因子浓度（100%, 50%, 25%, 12.5%, 6.25%）。

③　在双对数坐标纸上绘制凝固时间 (秒) vs 因子浓度 (%) 的曲线（或仪器自动生成）。

3. 稀释样本： 待测血浆和质控品用咪唑缓冲液稀释（通常是1:10）。

4. 进行检测：

①　加样：100µL 稀释后的校准点/样本/质控品 + 100µL 缺乏血浆 → 混匀，37°C 孵育1分钟。

②　加激活剂：加100µL aPTT试剂 → 混匀，37°C 精确孵育3分钟。

③　加钙启动：加100µL 预温37°C的 0.025M CaCl₂，同时启动计时器。

④　记录凝固时间 (CT)：记录纤维蛋白凝块形成的确切时间（秒）。

5. 计算： 根据待测样本的凝固时间，从校准曲线上查出对应的因子活性百分比 (%)。

六、储存和稳定性

· 未开封试剂：应在 2-8°C 下，以原包装储存。在此条件下，可使用至试剂盒上打印的有效期。

· 复溶后试剂：在无污染、无蒸发且密闭储存的情况下，稳定性如下：

· 在 2-8°C 下可保存 24 小时。

· 在室温（18-25°C）下可保存 8 小时。

· 在 - 20°C 或更低温度下可保存 2 个月（* 仅解冻一次，在 37°C 下尽快解冻并立即使用）。

七、警告和注意事项

· 试剂盒中的某些试剂含有人源材料。尽管在制备这些试剂时，若需要人血浆，会采用经批准的方法检测血浆中的 HIV 1、HIV 2 抗体、HCV 抗体以及乙肝表面抗原，且结果均为阴性，但没有任何检测方法能完-全保证不存在感染性因子。因此，这类试剂的使用者在处理这些生物材料时，必须极其谨慎，完-全遵守安全预防措施，就如同它们具有感染性一样。

· 废物应按照适用的当地法规进行处理。

· 只能使用同一批次试剂盒中的试剂。

· 老化研究表明，试剂在室温下运输不会降解。

· 该体外诊断设备仅供实验室专业人员使用。

八、预期值

成人血浆中正常因子 Ⅷ:C 水平通常在 50% 至 150% 的范围内，成人血浆中正常因子 Ⅸ、Ⅺ 和 Ⅻ 水平通常＞60%。然而，每个实验室必须确定自己的正常范围。

九、热销相关产品推荐（现货供应）

货号	名称	规格	货期
EZ006K	Human Thrombin	6 x 10NIH	现货
PP006B	Human Prothrombin	1 x 1 mg	现货
DP040K	FVIII:C Deficient Plasma	6 x 1 mL	现货
AG005K	Collagen	3 x 0.5 mg	现货
AG004K	Ristocetin	3 x 7.5 mg	现货
AG003K	Arachidonic Acid	3 x 7.5 μmol	现货
AG001K	ADP	3 x 0.1 μmol	现货
220412	BIOPHEN™ Factor XIa	2 x 3 mL	现货
221705	BIOPHEN™ Factor X	4 x 2.5 mL	现货
CK041K	HEMOCLOT Protein S	3x1 mL	现货
229001	BIOPHEN™ CS-01(38) - Thrombin Chromogenic substrate	1 x 25 mg	现货
229021	BIOPHEN™ CS-21(66) - Activated Protein C Chromogenic substrate	1 x 25 mg	现货
229014	BIOPHEN™ CS-11(65) - Factor Xa Chromogenic Substrate	1 x 25 mg	现货
229041	BIOPHEN™ CS-41(03) - Plasmin and Plasminogen-SK Chromogenic substrate	1 x 25 mg	现货
229091	BIOPHEN™ CS-05(88) - tPA and broad spectrum Chromogenic substrate	1 x 25 mg	现货

十、技术支持与采购信息

如需产品技术文档、COA 或定制服务，可联系国内授权代理商：
柏莱源（天津）生物科技有限公司
（专注凝血相关试剂供应，提供专业实验方案支持）