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PEI转染试剂的作用原理及比较

更新时间:2023-11-02点击次数:793

目前,将外源 DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类,即生物方法和物理化学方法。生物方法主要以病毒作为载体,通过病毒感染的方式将外源 DNA 导入到细胞中,其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统最为常用。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、脂质体介导的转染、显微 注射、电穿孔,以及最近出现的以高分子聚合物为载体的基 因传递技术。其中常用的是化学方法,磷酸钙、聚乙烯亚胺(PEI)、脂质体等化学试剂较为常用,那么接下来着重探讨一下PEI转染试剂的作用原理及比较吧。

PEI转染试剂的作用原理

使用广泛的阳离子聚合物转染试剂是PEI。PEI制备简单,价格便宜,有线状和枝状两种商业试剂可选。自19世纪 70年代发现PEI可以结合DNA质粒,直到20年后,PEI才真正用于哺乳动物细胞转染,成为非常有潜力的非病毒质粒载体试剂。由于PEI带正电荷,与带负电荷的DNA结合形成带正电荷的PEI-DNA复合物,可以与带负电荷的细胞表面结合。PEI-DNA复合物通过胞吞作用进入细胞内部形成内涵体,之后一部分从内涵体中逃逸进入细胞核内,未逃逸的进入溶酶体被降解,无法入核的DNA会在100min内被胞浆中的DNA酶降解(如下图)。每毫升转染试剂和质粒混合物形成约1×1010个DNA/PEI复合物,大小为300nm左右。经过15min孵育,转染时每个细胞进入约250个 DNA/PEI 复合物。

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不同 PEI 的比较

枝状的800kD PEI是shou次报道的可用于多种细胞转染的试剂,枝状的25kD PEI(25B)用于HEK293细胞大规模瞬时转染,其转染效率较枝状2kD、600kD、800kD 或线状22kD PEI(22L)的高。 之后比较了枝状70kD、50 ~ 100 kD、25kD PEI和线状25 kD PEI(25L),结果表明25B和25L的转染效率较高,适合于哺乳动物细胞转染,但是 25L比25B更适用于悬浮哺乳动物细胞HEK293和CHO转染。

polysciences转染试剂

成立于1961年的美国Polysciences公司,是一家历史久远的化学品制造公司,产品广泛应用于各个科研领域。Polysciences在PEI的制造工艺上具有长达20多年的经验,其经典的PEI产品系列包括研究级产品PEI 25K,PEI MAX和Transporter 5,以及cGMP级MAXgene GMP(Figure 1),被广泛用于抗体药物和重组蛋白,临床等级慢病毒和AAV病毒的大规模生产,为全球客户提供成本效益高、供应稳定和质量可靠的选择。在过去10年期间,相关产品已被用于国内外多项临床申报。

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我司提供Polysciences品牌以下试剂:


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Polyethylenimine, Linear(MW25,000)

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